华大单细胞转录组测序
华大基因DNBelab C4单细胞测序平台基于负压驱动的液滴微流控系统，创新整合自主专利的Disc-seq液滴标签技术，通过超泊松分布的磁珠-液滴包裹机制，将携带唯一细胞标签（Cell Barcode）和液滴标签（Droplet Barcode）的磁珠与单个细胞/核共包裹于液滴内，在液滴内同步完成细胞裂解及mRNA捕获，借助磁珠polyT引物实现mRNA逆转录为双标签cDNA，并通过分离cDNA与Oligo产物分别构建文库，结合华大DNBSEQ™测序平台实现高通量检测。目前广泛应用于肿瘤微环境异质性研究、胚胎发育、克隆进化、疾病机理和人体免疫微环境等
技术原理
- 单细胞悬液制备：将组织解离获得质量合格的单细胞悬液
- 液滴生成：使用华大DNBelab C系列高通量单细胞RNA文库制备试剂盒套装，通过单细胞液滴生成仪，将细胞悬液与逆转录反应的相关试剂混匀作为细胞相，含有标签信息的大磁珠和小磁珠作为磁珠相，通过液滴微流控技术生成液滴
- 细胞裂解与反转录：在液滴中，细胞裂解释放mRNA，磁珠释放细胞条码和液滴条码，完成液滴内逆转录反应
- 文库构建与测序：破乳回收cDNA中间产物和oligo产物，分别进行cDNA文库和oligo文库的构建，并进行上机测序
- 数据分析：通过条形码信息将测序数据分配到单个细胞，进行基因表达定量、细胞类型鉴定及功能分析
技术优势
- 高通量测序能力：华大单细胞C4平台能够同时处理数千个单细胞，大大提高了数据获取的效率和准确性
- 多维度数据分析：平台不仅提供基因表达数据，还能进行转录组、表观基因组等多维度分析，帮助科研人员全面理解细胞状态
- 强大的数据处理能力：华大基因自主研发的生物信息学工具，能够高效处理海量数据，提供直观、易懂的可视化结果，助力科研人员快速得出结论
- 广泛的应用领域：无论是肿瘤研究、免疫学、神经科学，还是发育生物学，华大DNBelab C系列单细胞测序平台都能提供定制化的解决方案，满足不同科研需求
应用方向
- 细胞图谱构建：精准鉴定细胞类型，揭示组织细胞组成与异质性
- 发育与分化研究：解析胚胎发育、组织形成及干细胞分化的分子机制
- 疾病机制探索：研究肿瘤异质性、免疫微环境及疾病相关细胞亚群
- 精准医学与药物研发：发现疾病标志物、药物靶点，推动个性化治疗方案
- 多组学整合分析：结合表观组、蛋白组数据，深入解析基因调控网络
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