10×Visium CytAssist HD空间转录组
10x Visium HD空间转录组测序是10X Genomics公司于2024年推出的新一代高分辨率空间转录组测序技术,Visium HD采用探针捕获技术,基于CytAssist仪器转片,由于无需预透化实验使得整个实验简洁高效,捕获区域为6.5×6.5 mm规格,以2×2μm带有空间位置标签小方格连续无间隙排列从而实现单细胞分辨率,为肿瘤生物学、神经科学、发育生物学及临床研究提供更精细的分子图谱
技术原理
- 组织样本准备:新鲜冷冻(FF)或福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)样本,切片后贴附于Visium玻片
- 组织染色与成像:对切片进行染色(比如HE)
- 探针杂交与CytAssist转片:探针杂交与连接、CytAssist转片
- 文库构建:将带有空间条形码的cDNA片段进行扩增,并添加测序引物,构建高通量测序文库
- 高通量测序:使用测序平台进行测序,获取每个空间位置的基因表达数据
- 数据分析:10X Space Ranger表达定量分析与Loupe Browser交互式查看基因表达的空间分布


技术优势
- 单细胞级空间分辨率:通过2μm超高密度探针阵列,实现单细胞级别的基因定位,精准空间定位稀有细胞亚群
- 优化的探针设计:探针支持人与小鼠全转录组覆盖
- 多模态数据无缝整合:基因表达数据与HE染色自动对齐,实现组织形态与转录组关联分析
应用方向
- 肿瘤生物学与精准医疗:绘制肿瘤亚克隆空间图谱、空间特异性生物标志物
- 神经科学与脑疾病研究:解析神经元亚型在脑区的精确分布、追踪神经退行性疾病病理特征
- 发育与再生医学:胚胎发育中细胞命运决定的时空动态、类器官模型空间模拟度评估
- 免疫学与炎症疾病:可视化免疫细胞-基质细胞互作、定位自身免疫病的炎症起始灶
- 临床病理与生物标志物发现:空间多组学队列研究、空间预后模型