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多重免疫荧光

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多重免疫荧光技术(Multiplex immunofluorescence,简称mIF),是指在同一组织切片上同时应用多种特异性抗体,通过不同的荧光染料标记,实现对多种抗原的同时检测。这一技术的核心在于酪胺信号放大系统(TSA),它利用辣根过氧化物酶(HRP)催化酪胺盐生成高活性的酪胺自由基,这些自由基与组织抗原周围的富电子酪氨酸残基共价结合,形成稳定的荧光沉积物。这种共价结合的方式相较于传统的氢键结合(一抗与二抗之间)更为稳固,即使在强烈的洗脱条件下也能保持信号的稳定,从而允许在同一组织切片上反复进行抗体染色,实现多重标记。

 

技术原理

利用辣根过氧化酶(Horseradish Peroxidase, HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测,该方法基于酪胺信号放大的多重顺次免疫染色技术,允许同时检测样本上的多个目标靶点

 

图1 丨MIF实验原理

 

图2 丨MIF研究流程

 

产品优势

 

  • 单一切片检测多靶标,提高检测效率,节省样本;
  • 原位展示+定量分析双重优势;
  • 高维度数据挖掘,支持共定位等分析(如免疫细胞与肿瘤细胞互作);
  • 展示空间位置关系,区分不同细胞亚群;
  • 可以实现灵活圈选。

 

 

应用方向

  • 肿瘤微环境;
  • 肿瘤免疫浸润;
  • 细胞衰老/凋亡/铁死亡/细胞自噬等;
  • 代谢、神经等相关领域;
  • 其他需要多个蛋白质靶标同时检测的领域。

 

结果展示

 

送样要求

 

样本类型

保存容器

保存及运输

样本量

运输方式

备注

手术组织

◆广口、密封性良好、耐腐蚀的塑料或玻璃容器
◆含组织固定液(10% 中性福尔马林)
固定液的体积必须至少是样本体积的◆10倍,且组织不受固定容器挤压

4℃

m≥50mg (黄豆样大小)
可放进包埋盒内不挤压。
包埋盒大小为
4.3cm*2.8cm*0.7cm

冰袋运输

◆样本离体后,应在最短时间内(最好在30分钟内)放入足量的10%中性福尔马林中,确保样本完全浸没
◆常规活检样本(厚度约 0.3-0.5 厘米):建议固定 6-12 小时
◆一般手术样本(厚度约 1-2 厘米):建议固定 24-48 小时
◆室温固定后将固定液置换成70%酒精4℃保存 3个月内完成送样;注意在运输过程中冰袋与组织样本不能直接接触。避免样本结冰。
◆组织块过大,须切割处理,确保所有切面都能充分接触到固定液。

◆广口、密封性良好、耐腐蚀的塑料或玻璃容器
◆无组织保护液

<-20℃

干冰运输

组织离体后用纱布或滤纸除去血液,立即置于容器中,干冰运输。

穿刺组织

Ÿ2mL 冻存管
含组织固定液(10% 中性福尔马林)
Ÿ足量的固定液,确保穿刺条完全浸没

4℃

长约 1−2 cm、直径约 0.1−0.2 cm 的组织条。

冰袋运输

◆穿刺样本推荐固定时间:6-12 小时。
◆对于较小的组织样本,避免挤压、切割或污染,确保组织完全浸泡于保护液中
◆为了确保样本的代表性和研究的成功率,强烈建议进行多次穿刺以获取多根组织条

1.5mL EP
无组织保护液

<-20℃

 

干冰运输

将装有样本的容器放入冰盒或装有冰袋的保温箱中
避免直接接触冰块:确保样本容器与冰块之间有缓冲,不要让样本直接接触冰块,以防部分组织冻结。

手术组织 (石蜡包埋)

白片盒或石蜡块

<37℃

白片≥6张(白片厚度4-5μm),石蜡块中组织含量≥50mg(保存时间<2年)

常温运输

不收取染色切片

切片不可叠放

◆切片完整、无破损单张切片总面积>20mm^2

穿刺组织 (石蜡包埋)

白片盒或石蜡块

<37℃

白片≥6张(白片厚度4-5μm),石蜡块中组织含量≥50mg(保存时间<2年)

常温运输

 

 

产品详情

产品分类

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