多重免疫荧光
多重免疫荧光技术(Multiplex immunofluorescence,简称mIF),是指在同一组织切片上同时应用多种特异性抗体,通过不同的荧光染料标记,实现对多种抗原的同时检测。这一技术的核心在于酪胺信号放大系统(TSA),它利用辣根过氧化物酶(HRP)催化酪胺盐生成高活性的酪胺自由基,这些自由基与组织抗原周围的富电子酪氨酸残基共价结合,形成稳定的荧光沉积物。这种共价结合的方式相较于传统的氢键结合(一抗与二抗之间)更为稳固,即使在强烈的洗脱条件下也能保持信号的稳定,从而允许在同一组织切片上反复进行抗体染色,实现多重标记。
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